4: Trabajar con levadura

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Este laboratorio le presentará las técnicas estándar utilizadas en microbiología. Se utilizan técnicas muy similares para cultivar levaduras y bacterias, aunque las condiciones de cultivo están optimizadas para cada organismo. En este laboratorio,
aprenderá técnicas estériles necesarias para mantener la integridad de las cepas de levadura en el laboratorio, así como métodos para cultivar células y estimar el número de células.

Objetivos

Al finalizar este laboratorio, los alumnos podrán:

definir y describir la relación entre especies, cepas y genotipos.
utilizar técnicas estériles para cultivar cepas de levadura en placas de agar.
describir las fases del crecimiento microbiano.
estimar la densidad de células en un cultivo líquido mediante espectrofotometría y siembra por puntos.

En este proyecto, estarás trabajando con múltiples cepas de levadura. Las cepas son microorgánimas de la misma especie que se derivan de una sola célula y se supone que poseen el mismo genotipo. Las cepas de laboratorio a menudo se han derivado de otras cepas mediante una cuidadosa planificación y experimentación, y sus genotipos están definidos al menos parcialmente. Las cepas se nombran de acuerdo con las convenciones de ese laboratorio, pero los nombres de las cepas no suelen ser informativos sobre la composición genética de la cepa. Las cepas de levadura se cultivan fácilmente en medios que contienen una fuente de carbono, una fuente de nitrógeno, sales, vitaminas y minerales esenciales.

Su éxito en este laboratorio dependerá de su capacidad para utilizar técnicas estériles de cultivo y transferencia que mantendrán el aislamiento genético de sus cepas de levadura. Un elemento igualmente importante en el éxito de los laboratorios es la contabilidad cuidadosa, ¡ya que las cepas de levadura se parecen! En este laboratorio aprenderás técnicas básicas utilizadas para cultivar y cuantificar microorganismos. Preparará cultivos de stock de cepas mutantes met de S. cerevisiae en placas de rayas. También aprenderás a cuantificar el número de células en cultivos líquidos de S. cerevisiae y S. pombe usando placas puntuales y el espectrofotómetro.