4.2: Medios de crecimiento de levadura

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Para el cultivo de rutina, los científicos suelen utilizar medios ricos que suministran todos los nutrientes que las células necesitan para crecer. Los componentes individuales de los medios enriquecidos suelen estar indefinidos. Por ejemplo, las levaduras se cultivan comúnmente en un medio conocido como YPD, el cual es sencillo y económico de preparar. La “Y” en YPD se refiere a un extracto de levadura, que contiene los compuestos solubles en agua generados cuando las levaduras se ven obligadas a autodigerir. (Aquellos de ustedes que han visitado Australia pueden tener extracto de levadura encoun- tered en la popular propagación, Marmite.) La “P” se refiere a la peptona, una mezcla de péptidos y aminoácidos preparada mediante la digestión de proteínas animales con proteasas. La “D” se refiere a la dextrosa, o glucosa, que es la fuente de carbono favorecida de la levadura (Sherman, 2002).

Debido a que el YPD está compuesto principalmente por extractos crudos, su composición puede mostrar una variación significativa de lote a lote. Esta variación rara vez es un problema, porque YPD contiene nutrientes esenciales más que suficientes para satisfacer los requerimientos metabólicos de las células. Muchos experimentos, sin embargo, requieren medios con una composición definida. Para satisfacer esta necesidad, la comunidad de levaduras ha desarrollado una variedad de medios sintéticos. Los componentes individuales de los medios sintéticos pueden manipularse para adaptarse a las necesidades de un experimento. (Más adelante en el semestre, utilizaremos medios definidos para seleccionar genotipos particulares.)

La levadura se puede cultivar en cultivos líquidos o en la superficie de placas que contienen medios sólidos. El agar se usa generalmente para solidificar medios de crecimiento líquidos cuando se preparan placas. Las cepas se mantienen típicamente en placas de agar para su uso rutinario. Las células crecen en colonias en placas. Las células en una colonia son genéticamente muy similares, si no idénticas, porque se derivan de la misma célula progenitora. La mayoría de las cepas de levadura se pueden almacenar en placas en el refrigerador durante varios meses con una mínima pérdida de viabilidad.