14.4: Tinción de geles SDS-PAGE
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- Apague la fuente de alimentación.
- Retire el aparato de gel del tanque. Abra el marco de sujeción y retire el sándwich de gel cas- sette. Con cuidado, separe las dos placas con una espátula. Con la espátula, retire la esquina inferior derecha o izquierda del gel para que sirva como marcador de orientación. Asegúrese de indicar en su cuaderno de laboratorio si la esquina con muescas corresponde al carril 1 o al carril 10 del gel. También puedes quitar el gel apilable con la espátula, si lo deseas.
- Coloca el gel en una pequeña bandeja de plástico y etiqueta la bandeja con tus iniciales en un trozo de cinta adhesiva. Para ello, llena la bandeja aproximadamente a la mitad con agua desionizada. Libere suavemente el gel de la placa de vidrio, permitiendo que se deslice en el agua. El gel debe moverse libremente en el agua. Coloca el gel y la bandeja sobre una plataforma mecedora. Rocíe el gel durante ~2 minutos.
- Escurre el agua del gel y agrega suficiente Simply Blue para cubrir el gel, mientras permite que el gel se mueva libremente cuando la bandeja esté balanceada. Cubra el recipiente de gel con envoltura de sarán y roca durante la noche. Asegúrese de que el gel no se pegue al fondo de la bandeja.
- Por la mañana, drene la mancha Simply Blue en un contenedor de desechos debidamente etiquetado en el capó de la sala de laboratorio.
- Destina el gel llenando el recipiente aproximadamente medio lleno con agua desionizada. Agitar el gel en el agua durante ~2 minutos. Vierta el agua y agregue agua desionizada nueva. Repita, si es necesario, hasta que las bandas de proteínas se hagan visibles.
- Cuando las bandas individuales sean detectables, registre sus datos. Podrás fotografiar el gel con la cámara de tu celular sobre un fondo blanco. Alternativamente, coloque el gel en un protector de página de plástico transparente y escanee el gel.
- Después de registrar los datos, deseche el gel en el contenedor de residuos Biohazard.