1.4: Microscopios

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Información

Muchas características anatómicas importantes, especialmente aquellas que funcionan a nivel tisular o celular, son demasiado pequeñas para ser vistas a simple vista. El microscopio compuesto es una herramienta valiosa para ampliar pequeñas secciones de material biológico para que se puedan resolver detalles de otra manera inaccesibles.

Hay muchos tipos diferentes de microscopios. Solo aprenderemos sobre el microscopio óptico compuesto. Utiliza luz visible para visualizar el espécimen, pero pasa esa luz a través de dos lentes separadas para ampliar la imagen. Los microscopios compuestos que usaremos en este curso son instrumentos robustos pero aún tienen muchas partes móviles. Pueden dañarse y romperse por mal uso y mal manejo. Una gran parte de aprender a usar los microscopios adecuadamente implica aprender a evitar dañarlos. Para ello, primero hay que saber qué partes son cuáles. La Figura 1.12 identifica las partes clave del microscopio con las que necesita estar familiarizado.

En la Figura 1.12 se muestran dos microscopios compuestos. El de la izquierda es monocular y el de la derecha es binocular. Muchas de las partes de los dos microscopios se encuentran en ubicaciones ligeramente diferentes. Acostúmbrate a esto. Diferentes marcas y diferentes modelos de microscopios posicionan las partes clave de manera diferente.

Cuando te sientas por primera vez frente a un microscopio, siempre debes tomarte un segundo para encontrar las partes clave, especialmente las perillas de enfoque, la perilla de ajuste del condensador (si está presente) y las perillas de control de escenario. Al ver un espécimen, tus ojos estarán en los oculares, y si agarras la perilla equivocada por accidente, puedes perder tu imagen en el mejor de los casos, y dañar el microscopio en el peor de los casos. No asuma que recuerda dónde están las perillas de las llaves. Es posible que tenga un microscopio diferente al de la última vez.

Al guardar un microscopio siempre debes seguir esta lista:

Retire cualquier diapositiva que se encuentre en el escenario y devuélvala a la caja de diapositivas.
Gire la lente más pequeña o ninguna lente en su lugar por encima del escenario. Bajar la etapa algunas vueltas.
Enrolle sin apretar el cable en su mano comenzando cerca del microscopio y trabajando hacia el tapón.
Cuelgue el cordón enrollado sobre una lente ocular.
Mire el número en la parte posterior del microscopio, devuelva ese alcance a su caja numerada.

Si ya hay un microscopio en esa casilla numerada, marque su número y muévelo. Si no está numerado simplemente empújelo hacia la parte posterior de la caja y coloca el tuyo más cerca del frente. Tenemos algunos microscopios extra que almacenamos de esta manera.

Figura\(\PageIndex{1}\): Algunas partes clave de un microscopio óptico compuesto. (CC BY SA; Ross Whitwame **http://www.muw.edu/**)

El ocular

Aquí es donde estarán tus ojos. Si el microscopio es binocular, use ambos oculares. Con los microscopios binoculares, casi siempre puedes ajustar el ancho de los oculares para asegurar que se ajusten al espaciamiento de tus ojos. El ocular contiene la lente ocular, una de las dos lentes que realiza la lupa real en un microscopio compuesto.

El brazo portante

Al mover un microscopio, aunque sea solo de unas pocas pulgadas, siempre recójalo por el brazo portador. NO arrastre el microscopio: recójalo. El microscopio contará con pies de goma que evitan que se deslice, por lo que si intentas arrastrarlo, sacudirá y vibrará y posiblemente dañará las piezas. Nunca tome el microscopio por ninguna parte que no sea el brazo portador. Las otras partes son generalmente mucho más frágiles y propensas a romperse si lo intentas.

Las lentes de objetivo

La mayoría de los microscopios de luz compuestos contendrán de tres a cuatro lentes de objetivo que se pueden rotar sobre el portaobjetos. A veces estas lentes solo se llaman objetivos. Cuando un objetivo en particular se haya girado completamente a su posición, escuchará o sentirá un clic mientras ese objetivo se bloquea en su lugar. La lente objetivo es la segunda de las dos lentes que realiza la lupa real en un microscopio compuesto, por lo que si no se ajusta a la posición correcta, no verá la imagen adecuada. Cada lente de objetivo generalmente se puede desenroscar de su posición en la torreta giratoria que la aloja. Ten cuidado de que estás rotando la torreta, no desenroscando un objetivo. NO desenrosque los objetivos de la torreta. Cada lente objetivo tiene una potencia de aumento diferente, por lo que la imagen de tu diapositiva se ampliará en menor o mayor grado, dependiendo de qué lente objetivo hayas elegido. El poder de aumento de cada objetivo se escribirá en algún lugar del lado del objetivo, aunque a veces es difícil ver el número. El aumento de una lente objetivo siempre será un número entero. Habrá otras cosas escritas del lado de un objetivo, pero la que sea un número entero mayor que 1 será la ampliación. Se puede ignorar todo lo demás escrito ahí.

El escenario

El escenario es la plataforma a la que se sujetará el tobogán.

Clips de escenario

La diapositiva se mantendrá en su lugar en el escenario con clips de escenario. La mayoría de las veces, estos se sujetarán contra los lados de la diapositiva. No se sientan por encima ni por debajo del tobogán. Están accionados por resorte para sujetar los bordes de deslizamiento y bloquear la corredera en su lugar de manera que los controles del escenario puedan mover la posición de la corredera sin problemas. Si la diapositiva no está recortada en su lugar, no podrá reposicionar la diapositiva para encontrar características microscópicas de interés.

Controles de Escenario

Estos le permiten mover su diapositiva mientras la está viendo, pero solo si la diapositiva está correctamente recortada con los clips de escenario. Siempre encuentre dónde están en su microscopio antes de comenzar a ver su portaobjetos. Parece que nunca están en el mismo lugar en dos microscopios diferentes y si solo los tocas ciegamente mientras ves tu diapositiva, probablemente harás algo desafortunado a tu vista o a todo el microscopio. Siempre hay dos diales. Uno mueve el tobogán hacia la izquierda y hacia la derecha. El otro mueve el tobogán hacia arriba y hacia abajo. En ocasiones se encuentran uno encima del otro, como en el microscopio binocular que se muestra a la derecha en la Figura\(\PageIndex{1}\). En ocasiones se trata de dos esferas separadas, como en el microscopio monocular que se muestra a la izquierda en la Figura\(\PageIndex{1}\). En ocasiones se encuentran por encima del escenario, como en el microscopio monocular. En ocasiones se encuentran por debajo de la etapa, como en el ámbito binocular. Dedique unos segundos a encontrarlos cada vez antes de sentarse al microscopio.

Enfoque grueso

Esta es siempre la más grande de las dos perillas de enfoque. Por lo general, solo debes usar la perilla de enfoque grueso una vez por cada nueva diapositiva. Utilízala con el objetivo de menor potencia para obtener el espécimen aproximadamente en foco. Después de eso, solo usa la perilla de enfoque fino, incluso después de cambiar a un objetivo de mayor potencia. En ocasiones, la perilla de enfoque grueso es con la perilla de enfoque fino, como en el microscopio binocular en la Figura 1.12. En ocasiones se encuentra separado de la perilla de enfoque fino, como en el microscopio monocular en la Figura 1.12.

Enfoque fino

Esta es siempre la más pequeña de las dos perillas de enfoque. Este es el enfoque conocido que usará una y otra vez en la visualización de diapositivas. No cambie el enfoque grueso después de usarlo por primera vez, solo cambie el enfoque fino.

Ajuste del condensador

No todos los microscopios tienen una perilla de ajuste de condensador. Si solo hay dos perillas, como en el microscopio monocular de la Figura\(\PageIndex{1}\), esas dos son el foco grueso y el enfoque fino y solo hay que mantener esas dos separadas. Pero si hay una tercera perilla, es la perilla de ajuste del condensador. Como regla general, NO toque ni ajuste esta perilla. Controla qué tan lejos está el condensador de luz del portaobjetos, el cual debe ajustarse correctamente antes de usar el microscopio. Si lo mueves, lo tendrás en la posición equivocada. Si tu endoscopio tiene la perilla, averigua dónde está y evítala.

diafragma

Esto es directamente debajo del agujero en el escenario donde la luz pasa a través de la diapositiva. Se controla mediante una palanca que abre y cierra un iris para dejar pasar más o menos luz por el deslizamiento. En algunos ejemplares no hay mucho contraste entre los colores y tonalidades de los diferentes componentes que se magnifican. Cambiar lo brillante que es la vista ajustando el diafragma puede permitirle ver mejor algunos de los detalles que está tratando de magnificar.

Toma tu microscopio y muévalo físicamente a una nueva ubicación. Tráelo lo suficientemente cerca como para que puedas mirarlo cómodamente desde donde estás sentado. Colóquelo para que el escenario esté orientado hacia usted y el ocular gire hacia usted. ¿Qué parte del microscopio agarraste para recogerlo y moverlo?
¿Dónde están las ubicaciones de las perillas de ajuste de dos etapas en su microscopio?
¿Dónde está la ubicación de la perilla de enfoque grueso?
¿Dónde está la ubicación de la perilla de enfoque fino?
¿Hay una perilla de ajuste del condensador? Si es así, ¿dónde se encuentra?
Encuentra la palanca de diafragma. Mirando en el agujero en el centro del escenario, ¿qué sucede cuando mueves el diafragma con palanca en el sentido de las agujas del reloj?
Aún mirando hacia abajo el agujero en el centro del escenario, ¿qué sucede cuando deslizas la palanca del diafragma en sentido antihorario?

Laboratorio 1 Ejercicio\(\PageIndex{1}\)

Hay microscopios compuestos en las grandes cajas de madera en el frente de la habitación. Las cajas y los alcances están numerados. Use cualquier alcance que desee pero devuélvalo a la caja correctamente numerada. Realiza las actividades que se indican a continuación y rellena los espacios en blanco a medida que lo haces.

1. Toma tu microscopio y muévalo físicamente a una nueva ubicación. Tráelo lo suficientemente cerca como para que puedas mirarlo cómodamente desde donde estás sentado. Colóquelo para que el escenario esté orientado hacia usted y el ocular gire hacia usted. ¿Qué parte del microscopio agarraste para recogerlo y moverlo?

2. ¿Dónde están las ubicaciones de las perillas de ajuste de dos etapas en su microscopio?

3. ¿Dónde está la ubicación de la perilla de enfoque grueso?

4. ¿Dónde está la ubicación de la perilla de enfoque fino?

5. ¿Hay una perilla de ajuste del condensador? Si es así, ¿dónde se encuentra?

6. Encuentra la palanca de diafragma. Mirando en el agujero en el centro del escenario, ¿qué sucede cuando mueves la palanca del diafragma en el sentido de las agujas del reloj?

7. Aún mirando hacia abajo el agujero en el centro del escenario, ¿qué sucede cuando deslizas la palanca del diafragma en sentido antihorario?

LICENCIAS Y Atribuciones

CONTENIDO LICENCIADO CC, ORIGINAL

Laboratorios A&P. Autor: Ross Whitwam. Proporcionado por: Mississippi University para

Mujeres. Ubicado en: http://www.muw.edu/. Licencia: CC BY-SA: Atribución-CompartirIgual

Microscopio de luz compuesto etiquetado. Autor: Ross Whitwam. Proporcionado por: Mississippi University for Women. Ubicado en: http://www.muw.edu/. Licencia: CC BY-SA: Atribución- CompartirIgual

Ampliación y Resolución

La razón para usar un microscopio es ampliar las características hasta el punto de que se puedan resolver nuevos detalles.

El aumento es el factor por el cual una imagen parece estar agrandada. Será un número entero mayor a 1 y suele ir seguido de una “x”, como en el aumento de 10x.

Cuando miras a través de los oculares del microscopio, estás viendo una imagen virtual porque en la realidad, lo que estás viendo no es tan grande como aparece a través de los oculares, y porque puede haber alguna distorsión de la imagen.

La resolución es la distancia más corta entre dos puntos que aún se pueden distinguir visualmente como separados. La resolución de un ojo humano típico sin ayuda es de aproximadamente 200 µm. El uso de un microscopio disminuye la resolución a distancias tan cortas como 0.2 µm. La resolución es una propiedad del ojo.

El poder de resolución es la capacidad de una lente para mostrar dos objetos adyacentes como discretos. El poder de resolución es una propiedad de una lente.

Cada lente en un microscopio tiene un valor de apertura numérica, o NA. Esto tiene que ver con los ángulos de luz que entran y salen de una lente. Sus aplicaciones están más allá del alcance de este laboratorio, pero la apertura numérica influye en la resolución posible con una lente en particular, por lo que el valor de NA para la lente generalmente se imprime en cada objetivo. Será un número menor a 1.0, y podrás ignorarlo para nuestros fines.

Cada lente en un microscopio también tiene un factor de aumento. Este es el grado en que esa lente magnifica una imagen. Será un número mayor a 1.0. Por ejemplo, un objetivo 10x magnifica la imagen diez veces. El factor de aumento para cada objetivo siempre está impreso en él, y el factor de aumento para cada ocular suele estar impreso en él. (Si al ocular le falta un factor de aumento impreso, generalmente puede asumir que es 10x.)

El aumento total para cualquier imagen vista bajo un microscopio compuesto se calcula usando la fórmula:

Aumento total = factor de aumento ocular * factor de aumento objetivo

Entonces, cada vez que cambias de objetivos, cambias el aumento total. El aumento total no tiene unidades, pero generalmente se indica con una “x”, como en “aumento total = 100x”.

Laboratorio 1 Ejercicio\(\PageIndex{2}\)

Hay microscopios compuestos en las grandes cajas de madera en el frente de la habitación. Las cajas y los alcances están numerados. Usa cualquier alcance que quieras pero devuélvelo a la caja correctamente numerada. Realiza las actividades que se indican a continuación y rellena los espacios en blanco a medida que lo haces.

1. Anote el factor de aumento para las lentes oculares en el microscopio frente a usted.

2. Usando el microscopio frente a ti, escribe todas las palabras y números escritos en cada objetivo en tu microscopio. Probablemente hay tres objetivos, pero algunos microscopios podrían tener cuatro. Comience con el objetivo más pequeño y muévase a través de ellos en orden de aumentar el tamaño

Objetivo uno:

Objetivo dos:

Objetivo tres:

Objetivo cuatro:

3. En la lista anterior, para cada objetivo, circunda solo el factor de aumento para ese objetivo. Recuerde, el factor de aumento es un número entero, y difiere para cada objetivo diferente.

4. Anote el aumento total (factor de aumento ocular * factor de aumento objetivo) al usar cada objetivo en el microscopio frente a usted.