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2.3: Espectroscopia de luz

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    Los espectrofotómetros miden la cantidad de luz absorbida por una muestra a una longitud de onda particular. La absorbancia de la muestra depende de las estructuras electrónicas de las moléculas presentes en la muestra. Las mediciones generalmente se realizan a una longitud de onda cercana al máximo de absorbancia para la molécula de interés en la muestra.

    El siguiente diagrama muestra los elementos presentes en un espectrofotómetro típico. Las fuentes de luz utilizadas en la mayoría de los espectrofotómetros emiten luz ultravioleta o visible. La luz
    (Io) pasa de una fuente a un monocromador, que se puede ajustar para permitir que solo pase la luz de una longitud de onda definida. La luz monocromática (I) pasa luego a través de una cubeta que contiene la muestra a un detector.

    El espectrofotómetro compara la fracción de luz que pasa por el monocromador (I 0) con la luz que llega al detector (I) y calcula la transmitancia (T) como I/I 0. La absorbancia (A) es una función logarítmica de la transmitancia y se calcula como:

    A = log 10 (1/T) = log 10 (I 0 /I)

    Los espectrofotómetros pueden expresar datos como% de transmitancia o absorbancia. La mayoría de los investigadores prefieren recolectar valores de absorbancia, ya que la absorbancia de un compuesto es directamente proporcional a su concentración. Recordemos la Ley Lambert-Beer, tradicionalmente expresada como:

    A =\(\varepsilon\) b C

    donde\(\varepsilon\) es el coeficiente de extinción molar de un compuesto, b es la longitud de la trayectoria de la luz a través de la muestra, y C es la concentración molar del compuesto. Las cubetas se formulan para tener una trayectoria de luz de 1 cm, y el coeficiente de extinción molar se expresa como L/moles-cm. En consecuencia, la absorbancia es un valor sin unidades.


    This page titled 2.3: Espectroscopia de luz is shared under a CC BY-NC-SA license and was authored, remixed, and/or curated by Clare M. O’Connor.