8.5: Tinción y análisis del gel de agarosa
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Use guantes desechables cuando manche geles. Los guantes son importantes cuando se trabaja con colorantes intercalantes, que son mutágenos potenciales.
- Retire el gel del aparato y transfiera el gel a una bandeja pequeña. Cubrir el gel con agua desionizada. Agregue 5 μL de solución de EtBr (10 mg/mL) a la bandeja. ¿Cuál es la concentración aproximada de EtBr en la solución de tinción?
- Colocar la bandeja sobre una plataforma mecedora y balancear suavemente durante 20-30 minutos.
- Drene la solución de ETBr en el contenedor de desechos apropiado en la campana extractora de humos.
- Cubra el gel con agua desionizada y roce suavemente durante 1 minuto.
- Con una espátula, coloque cuidadosamente el gel sobre el transiluminador y cierre la cubierta al aparato Gel- Logic. (Drene la solución de lavado en el contenedor de desechos).
- Encienda la luz del transiluminador y fotografíe el gel de acuerdo con las instrucciones publicadas. Apague el transiluminador inmediatamente después de fotografiar el gel. Guarda la imagen y envíate una copia por correo electrónico a ti mismo. (Si no hay bandas aparentes, la tinción puede repetirse por un período de tiempo más largo).
- Abre la puerta del aparato GelLogic. Usa la espátula para transferir el gel a un contenedor de residuos configurado para geles teñidos con EtBR.
- Determine la longitud aproximada de las moléculas de ADN en sus muestras comparando su migración con la de los estándares. ¿Los tamaños son consistentes con sus expectativas?