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12.6: Ejercicio 2 - Réplica de chapado y complementación

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    Este ejercicio se realizará en la próxima sesión de laboratorio después de que los transformantes hayan tenido la oportunidad de crecer.

    Su selección inicial de transformantes se realizó en placas que carecían de uracilo, pero contenían metionina. A continuación, probará la capacidad de sus cepas transformadas para crecer en medios que carecen de metionina usando placas de réplica. Utilizaremos medios libres de metionina que contengan glucosa o galactosa para las réplicas, y también preparará una placa maestra fresca. Predecir qué transformantes crecerán en cada una de las placas.

    Es importante tener un toque ligero durante el chapado de réplica!! El objetivo es transferir una pequeña porción de células de cada colonia en la placa maestra (las placas que llevan sus transforros) a varias placas que contienen diferentes medios.

    1. Coloque una marca de orientación con un Sharpie en el perímetro de su placa maestra, así como las placas que se utilizarán para las réplicas.

    2. Retire la tapa de su placa maestra e invierta la placa en el bloque, alineando el marcador de orientación en la placa con el marcador en el bloque. Toque suavemente y uniformemente el bot- tom de la placa para transferir las celdas a la pana. Retire la placa maestra y reemplace la tapa. Deberías ver colonias blancas tenues sobre la pana.

    3. Repita el paso 3 con placas que contengan los siguientes medios:

    • Medio sin uracilo ni metionina, que contiene glucosa
    • Medio sin uracilo ni metionina, que contiene galactosa
    • Medio sin uracilo, que contiene glucosa y metionina


    This page titled 12.6: Ejercicio 2 - Réplica de chapado y complementación is shared under a CC BY-NC-SA license and was authored, remixed, and/or curated by Clare M. O’Connor.