Saltar al contenido principal
Library homepage
 
LibreTexts Español

15: Western blots

  • Page ID
    53646
  • \( \newcommand{\vecs}[1]{\overset { \scriptstyle \rightharpoonup} {\mathbf{#1}} } \) \( \newcommand{\vecd}[1]{\overset{-\!-\!\rightharpoonup}{\vphantom{a}\smash {#1}}} \)\(\newcommand{\id}{\mathrm{id}}\) \( \newcommand{\Span}{\mathrm{span}}\) \( \newcommand{\kernel}{\mathrm{null}\,}\) \( \newcommand{\range}{\mathrm{range}\,}\) \( \newcommand{\RealPart}{\mathrm{Re}}\) \( \newcommand{\ImaginaryPart}{\mathrm{Im}}\) \( \newcommand{\Argument}{\mathrm{Arg}}\) \( \newcommand{\norm}[1]{\| #1 \|}\) \( \newcommand{\inner}[2]{\langle #1, #2 \rangle}\) \( \newcommand{\Span}{\mathrm{span}}\) \(\newcommand{\id}{\mathrm{id}}\) \( \newcommand{\Span}{\mathrm{span}}\) \( \newcommand{\kernel}{\mathrm{null}\,}\) \( \newcommand{\range}{\mathrm{range}\,}\) \( \newcommand{\RealPart}{\mathrm{Re}}\) \( \newcommand{\ImaginaryPart}{\mathrm{Im}}\) \( \newcommand{\Argument}{\mathrm{Arg}}\) \( \newcommand{\norm}[1]{\| #1 \|}\) \( \newcommand{\inner}[2]{\langle #1, #2 \rangle}\) \( \newcommand{\Span}{\mathrm{span}}\)\(\newcommand{\AA}{\unicode[.8,0]{x212B}}\)

    Las Western blot son una de las técnicas más utilizadas en biología celular. En una Western blot, los investigadores aprovechan la exquisita sensibilidad de los anticuerpos para identificar proteínas de interés en muestras complejas. En este laboratorio, conocerás los diferentes tipos de anticuerpos utilizados en las Western Blots. Utilizarás Western blots para analizar la expresión de proteínas Met y LacZ en tus cepas de levadura transformadas.


    Objetivos

    Al finalizar este laboratorio, los alumnos podrán:

    • Explicar cómo se producen los anticuerpos monoclonales y policlonales.
    • Identificar las diferentes regiones funcionales de los anticuerpos y explicar cómo se usan en las Western Blots
    • Diseñar una estrategia que utilice anticuerpos para detectar proteínas etiquetadas con epítopos.
    • Preparar una Western blot para analizar la expresión de proteínas en extractos celulares.

    Las Western blot proporcionan un método para encontrar la proverbial “aguja en un pajar”. Una célula típica expresa miles de proteínas diferentes, y a menudo es difícil detectar cambios en la expresión de su proteína favorita (Yfp) sin una sonda que sea capaz de discriminar al Yfp contra un gran fondo de proteínas celulares no relacionadas. Afortunadamente, los anticuerpos proporcionan sondas moleculares altamente específicas que pueden ser utilizadas para detectar la expresión de proteínas en Western blot. Para apreciar la sensibilidad de las Western blots, es útil tener cierta comprensión de la estructura de los anticuerpos y la producción de anticuerpos durante las respones inmunitarias. (Descargo de responsabilidad: Los siguientes párrafos proporcionan una visión general altamente abreviada de los anticuerpos y un segmento del complejo sistema inmune de vertebrados. El Departamento ofrece un curso de inmunología que le dará a conocer los detalles más finos de este fascinante sistema.)


    This page titled 15: Western blots is shared under a CC BY-NC-SA license and was authored, remixed, and/or curated by Clare M. O’Connor.