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9.15: Transcripción inversa

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    Según el dogma central, el ADN codifica ARNm, que codifica para proteína. Una excepción a esta regla se ve con los retrovirus, virus codificados por ARN que tienen una fase en su ciclo de replicación durante la cual su ARN genómico es copiado en ADN por una enzima codificada viralmente conocida como transcriptasa inversa. La capacidad de convertir ARN en ADN puede ser útil en el laboratorio. Por ejemplo, el poder de la PCR puede llevarse al ARN convirtiendo los ARN de interés en ADN y luego amplificándolos por PCR. Con la transcriptasa inversa, esto se logra fácilmente. Primero, se crea un oligonucleótido de ADN que sirve como cebador para que la transcriptasa inversa se use en un ARN diana. El cebador debe, por supuesto, ser complementario a un segmento (cerca del extremo 3') del ARN a amplificar. Se mezclan el molde de ARN, la transcriptasa inversa, el cebador y cuatro dNTPs. Con una ronda de replicación, el ARN se convierte en una sola cadena de ADN, que puede separarse del ARN ya sea por calentamiento o por el uso de una RNasa para digerir el ARN. El producto de este proceso se denomina ADN complementario (ADNc).

    Colaboradores


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