14: SDS-PAGE

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Este laboratorio le presentará SDS-PAGE, un método simple y económico para resolver proteínas en mezclas complejas.
Los geles SDS-PAGE proporcionan los materiales de partida para Western blots y para algunas técnicas proteómicas. En este laboratorio,
utilizará SDS-PAGE para analizar los extractos de proteínas que preparó a partir de cepas de levadura que sobreexpresan las
proteínas de fusión Met y LacZ.

Objetivos

Al finalizar este laboratorio, los alumnos podrán:

discutir los principios que rigen la separación de proteínas en geles SDS-PAGE discontinuos.
funde y ejecutar geles SDS-PAGE.
analizar el patrón de bandas en un gel SDS-PAGE teñido
estimar el peso molecular de una proteína a partir de su migración en geles SDS-PAGE

Este laboratorio le presentará SDS-PAGE (electroforesis en gel de dodecil sulfato de sodio - poliacrilamida), un método simple y económico para resolver proteínas en mezclas complejas. Utilizarás geles SDS-PAGE para analizar los extractos de proteína de levadura que preparaste en el último laboratorio. Cada equipo elaborará dos geles. Un gel se teñirá con Simply Blue para visualizar todos los pro- teins en los extractos. El segundo gel se utilizará para las manchas Western (Capítulo 15) que detectarán de manera específica las proteínas de fusión Met y LacZ en los extractos.