2.1: Apéndice I- Antibióticos y Codificación de Colores
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Verde = LB + Ampicilina 100 *
Negro = LB + Cloranfenicol 35 **
Azul = LB + Kanamicina 50 ***
Rojo = LB + Tetraciclina 10 ****
Selección de antibióticos
Ampicilina (Amp/A) Derivado de la penicilina que mata las células en crecimiento al interferir con la síntesis de la pared celular bacteriana. El gen de resistencia (bla) especifica una enzima periplásmica,\(\beta\) -lactamasa, que escinde el anillo\(\beta\) -lactama del antibiótico.
* Concentración de trabajo 100µg/mL; stock congelador 100mg/mL (en agua)
Cloranfenicol (Clor/C) Un agente bacteriostático que se une a la subunidad 50S del ribosoma y bloquea la peptidil-transferasa e inhibe la formación de enlaces peptídicos. El gen de resistencia, cloranfenicol acetiltransferasa (cat), especifica una enzima que hace que el antibiótico sea incapaz de unirse al ribosoma.
** Concentración de trabajo 35µg/mL; stock congelador 35mg/mL (en EtOH)
Kanamicina (Kan/K) Agente bactericida que se une a los ribosomas de los 70 y provoca una mala lectura del ARN mensajero. El gen de resistencia (kan) especifica una enzima (aminoglucósido fosfotransferasa) que modifica el antibiótico e impide su interacción con los ribosomas.
*** Concentración de trabajo 50µg/mL; stock congelador 50mg/mL (en agua)
Tetraciclina (Tet/T) Agente bacteriostático que se une al ribosoma 30S e interrumpe las interacciones de codones y anticodones. El gen de resistencia (tet) especifica una proteína transportadora multimérica que participa en la rápida salida de tetraciclina de la célula bacteriana, lo que la hace incapaz de acceder a los ribosomas.
**** Concentración de trabajo 10µg/mL; stock congelador 10mg/mL (en agua)