7.E: Mutación y Reparación del ADN (Ejercicios)
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Si la cadena superior del segmento de ADN GGTCGTT fue objetivo de reacción con ácido nitroso, y luego se sometió a dos rondas de replicación, ¿cuáles son los productos probables?
Q7.13
¿Son verdaderas o falsas las siguientes afirmaciones sobre la reparación por escisión de nucleótidos en E. coli?
- UvrA y UvrB reconocen distorsiones estructurales resultantes del daño en la hélice del ADN.
- En un complejo con UvrB, UvrC escinde la hebra dañada en cada lado de la lesión.
- La helicasa UvrD desenrolla el ADN, disociando así el parche dañado.
Q7.14
¿Las siguientes afirmaciones sobre la reparación de desajustes en E. coli son verdaderas o falsas?
- Los MUT reconocerán una falta de coincidencia.
- MuTL, en un complejo con ATP, se unirá a los MuT (unidos a la región no coincidente) y activará MuTh.
- MuTH escindirá 5' a la G del motivo GATC metilado más cercano (gMeATC).
- El sistema de reparación de desapareamientos puede discriminar entre cadenas de ADN antiguas y recién sintetizadas.
Para los siguientes 6 problemas, considere la siguiente secuencia de ADN, del primer exón del gen HRAS. Una transversión de G a T en la posición 24 confiere independencia de anclaje y tumorigenicidad a células NIH 3T3 (fibroblastos). Esta mutación es un paso en la transformación tumorigénica de las células de la vejiga, y probablemente juega un papel en otros cánceres.
10 20 30
5' TAAGCTGGTG GTGGTGGGCG CCGGCGGTGT
3' ATTCGACCAC CACCACCCGC GGCCGCCACA
Q7.15
hat ¿sería la secuencia si la G en la posición 14 (cadena superior) fuera alquilada en la posición O6 por MNNG y luego pasara por 2 rondas de replicación?
Q7.16
hat ¿sería la secuencia si la C en la posición 24 (cadena inferior) fuera oxidada por HNO 2 y luego pasara por 2 rondas de replicación?
Q7.17
¿Qué pasaría si esta secuencia fuera irradiada con UV a una longitud de onda de 260 nm?
Q7.18
Si estuvieras a cargo de mantener esta secuencia de ADN, y tuvieras las herramientas enzimáticas conocidas en E. coli, ¿cómo repararías el daño de la pregunta 7.15? Considera qué pasaría si los daños fueran corregidos antes o después de la replicación.
Q7.19
¿Cómo podría
- el daño oxidativo en el problema 7.16 o
- los productos UV en problema 7.17 ser reparados?