12.3C: Cultivo de espécimen
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Objetivos de aprendizaje
- Describir cómo la observación directa con microscopio de un espécimen fresco o teñido es uno de los métodos más rápidos para determinar sus características
Puntos Clave
- El éxito de la identificación y tratamiento de patógenos depende de cómo se recolecta, maneja y almacena el espécimen.
- Las técnicas de diagnóstico de laboratorio incluyen pruebas directas con microscopio, y métodos inmunológicos o genéticos que proporcionan pistas inmediatas sobre la identidad del microbio o microbios en la muestra.
- Después de pruebas directas, se requiere cultivo, aislamiento e identificación de patógenos utilizando una amplia variedad de pruebas generales y específicas.
Términos Clave
- manitol: Un alcohol polihidroxilado, un isómero del sorbitol, utilizado como edulcorante artificial.
- Agar MacConkey: Un medio de cultivo diseñado para cultivar bacterias Gram-negativas y diferenciarlas de la fermentación de lactosa.
Cultivo de Especimen
El éxito de la identificación y tratamiento de patógenos depende de cómo se recolecta, maneja y almacena el espécimen. También es crítico que el patógeno se aísle primero en un cultivo puro. La observación directa con microscopio de un espécimen fresco o teñido es uno de los métodos más rápidos para determinar las características. Las manchas que se emplean con mayor frecuencia para las bacterias son la mancha gram, aunque no funcionan en algunos organismos.
La prueba de anticuerpos de fluorescencia directa (DFA) puede resaltar la presencia del microbio en especímenes de pacientes mediante anticuerpos marcados. Esta prueba es útil para bacterias como la espiroqueta de la sífilis, que no se cultivan fácilmente en un laboratorio, o si un diagnóstico rápido es esencial para la supervivencia de un paciente.
En la mayoría de los casos, también se inoculan especímenes en medios diferenciales que definen características tales como patrones de fermentación (sal de manitol y agar MacConkey) y como reacciones en sangre (agar sangre). La sangre de un paciente generalmente se cultiva en una botella especial de caldo que se puede muestrear periódicamente para su crecimiento. El trabajo debe realizarse a partir de colonias aisladas o cultivos puros, ya que trabajar con cultivos mixtos o contaminados da resultados engañosos e inexactos. De dichos aislamientos, los microbiólogos clínicos obtienen información sobre la morfología microscópica y las reacciones de tinción del patógeno, la apariencia del cultivo, la motilidad, los requerimientos de oxígeno y las características bioquímicas de un patógeno.
Las pruebas serológicas utilizan pruebas diagnósticas in vitro de suero, tienen un alto grado de especificidad y sensibilidad, y se basan en la especificidad que tiene un anticuerpo para su antígeno. Estas técnicas no requieren un paso de cultivo. El suero se puede usar directamente en aglutinación, precipitación, fijación del complemento, microscopía fluorescente y ensayos ligados a enzimas. Los resultados del análisis de especímenes se ingresan en el cuadro resumido del paciente.