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8.5: Tinción y análisis del gel de agarosa

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    NOTA DE SEGURIDAD:

    Use guantes desechables cuando manche geles. Los guantes son importantes cuando se trabaja con colorantes intercalantes, que son mutágenos potenciales.

    1. Retire el gel del aparato y transfiera el gel a una bandeja pequeña. Cubrir el gel con agua desionizada. Agregue 5 μL de solución de EtBr (10 mg/mL) a la bandeja. ¿Cuál es la concentración aproximada de EtBr en la solución de tinción?
    2. Colocar la bandeja sobre una plataforma mecedora y balancear suavemente durante 20-30 minutos.
    3. Drene la solución de ETBr en el contenedor de desechos apropiado en la campana extractora de humos.
    4. Cubra el gel con agua desionizada y roce suavemente durante 1 minuto.
    5. Con una espátula, coloque cuidadosamente el gel sobre el transiluminador y cierre la cubierta al aparato Gel- Logic. (Drene la solución de lavado en el contenedor de desechos).
    6. Encienda la luz del transiluminador y fotografíe el gel de acuerdo con las instrucciones publicadas. Apague el transiluminador inmediatamente después de fotografiar el gel. Guarda la imagen y envíate una copia por correo electrónico a ti mismo. (Si no hay bandas aparentes, la tinción puede repetirse por un período de tiempo más largo).
    7. Abre la puerta del aparato GelLogic. Usa la espátula para transferir el gel a un contenedor de residuos configurado para geles teñidos con EtBR.
    8. Determine la longitud aproximada de las moléculas de ADN en sus muestras comparando su migración con la de los estándares. ¿Los tamaños son consistentes con sus expectativas?

    This page titled 8.5: Tinción y análisis del gel de agarosa was last modified on Sat, 29 Oct 2022 22:10:38 GMT and is shared under a CC BY-NC-SA license and was authored, remixed, and/or curated by Clare M. O’Connor.