4.1: Técnica estéril
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Algunas precauciones simples reducirán la posibilidad de contaminación:
- Limpie una pequeña área de trabajo en el banco de laboratorio con etanol al 70%.
- Enciende un quemador Bunsen en tu área de trabajo mientras trabajas con cepas. El quemador produce una corriente ascendente que evita que los microorganismos en el aire caigan a los cultivos.
- Use reactivos estériles, puntas de micropipeta y tubos de ensayo. Las puntas y los tubos de microcentrífuga deben mantenerse en recipientes cubiertos cuando no estén en uso.
- Minimizar la contaminación de la ropa y las superficies corporales. Tire hacia atrás y asegure el cabello largo. Evite tocar o respirar sobre superficies estériles que entren en contacto con microorganismos.
- Evita hablar cuando estés transfiriendo cepas.
- ¡Trabaja rápido! Minimizar el tiempo que se retiran las copas de los vasos que contienen microorganismos o medios.
- Mantenga las tapas hacia arriba para evitar la contaminación de los microbios transportados por el aire.
Los medios de cultivo y reactivos que usaremos han sido esterilizados ya sea por autoclave o filtración. Un autoclave es una cámara que utiliza vapor presurizado para matar celdas en superficies o en soluciones, usando temperaturas cercanas a 121° C y presiones de 30-40 psi. (A modo de comparación, la presión atmosférica es de ~15 psi.) La ultrafiltración se utiliza en lugar del autoclave cuando las soluciones contienen compuestos sensibles a la temperatura. Los poros en los filtros suelen tener 0.2 o 0.45 μm de diámetro. Estos poros son lo suficientemente pequeños para evitar el paso de bacterias, pero no de virus o macromoléculas.