2.10: Ácidos Nucleicos
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Los ácidos nucleicos están compuestos por nucleótidos enlazados. El ADN incluye el azúcar, desoxirribosa, combinado con grupos fosfato y combinaciones de timina, citosina, guanina y adenina. El ARN incluye el azúcar, ribosa con grupos fosfato y combinaciones de uracilo, citosina, guanina y adenina.
El ADN y el ARN son ácidos nucleicos y conforman las instrucciones genéticas de un organismo. Sus monómeros se denominan nucleótidos, los cuales están formados por subunidades individuales. Los nucleótidos consisten en un azúcar de 5 carbonos (una pentosa), un fosfato cargado y una base nitrogenada (adenina, guanina, timina, citosina o uracilo). Cada carbono de la pentosa tiene una designación de posición del 1 al 5. Una diferencia importante entre el ADN y el ARN es que el ADN contiene desoxirribosa y el ARN contiene ribosa. La característica discriminante entre estas pentosas está en la posición 2' donde un grupo hidroxilo en la ribosa está sustituido con un hidrógeno.
El ADN tiene una estructura de doble hélice. Dos hebras antiparalelas están unidas por enlaces de hidrógeno.
El siguiente video ilustra la estructura y propiedades del ADN.
El ADN es una molécula de doble hélice. Dos hebras antiparalelas están unidas entre sí por enlaces de hidrógeno. La adenina forma 2 enlaces H con Timina. La guanina forma 3 enlaces H con la citosina. Esta coincidencia AT & GC se conoce como complementariedad. Mientras que las bases nitrogenadas se encuentran en el interior de la doble hélice (como peldaños en una escalera), la columna vertebral repetitiva del azúcar pentosa y el fosfato forman la columna vertebral de la molécula. Observe que el fosfato tiene una carga negativa. Esto hace que el ADN y el ARN, en general estén cargados negativamente.
Hay 10 bases por cada giro completo en la doble hélice del ADN.
Ácidos nucleicos: extracción de ADN y prueba de difenilamina de Dische (actividad)
Preguntas sobre Prelab
- ¿Qué son las frutas?
- ¿De dónde vienen?
- ¿De qué están hechos?
- Utilizar filogenia para clasificar plantas (DKPCOFGS)
- ¿Dónde se encuentra el ADN dentro de los frutos? ¿Dónde se encuentra en ti?
- ¿Por qué querrías extraer ADN de un organismo?
- ¿Qué clase de molécula es el ADN?
Extracción de ADN del fruto
Las instrucciones de panel único se pueden encontrar en https://github.com/jeremyseto/bio-oer/blob/master/figures/chemistry/DNA/fruitdnaisolation.svg
- Triturar unos 10g o 3cm de plátano demasiado maduro O 3 uvas O 1 fresa en bolsa con cierre.
- El plátano demasiado maduro es lo mejor ya que las paredes celulares ya se están descomponiendo
- El macerado físico continúa rompiendo las paredes celulares
2. Agrega 7ml de solución salina.
- La solución salina ayuda al ADN a agregarse (agruparse).
3. Agrega 7ml de detergente líquido y mezcla.
- Disuelve los lípidos en las membranas celulares y nucleares
- Libera ADN en la solución salina
4. Coloca un filtro de café sobre una taza o vaso de precipitados y fíjalo con una banda elástica.
- Vierta el puré a través del filtro en un vaso de precipitados
5. Vierte alrededor de 5 ml de filtrado en un tubo de ensayo.
6. Lentamente vierta un volumen IGUAL de etanol frío por el costado del tubo para formar una capa sobre el líquido de la fruta.
- Con cuidado, pase el alcohol por un lado para formar una capa separada encima de la solución de la fruta.
- No mezcle la solución de alcohol y plátano.
- El etanol 100% helado funciona mejor.
7. Enrollar el ADN: use un lazo de plástico o una varilla de vidrio para girar suavemente en la interfaz de las dos soluciones.
- La interfaz es donde se encuentran las dos soluciones.
- El ADN no es soluble en alcohol.
- Se pueden formar burbujas alrededor de una sustancia lanuda (este es el ADN).
8. Transferir el ADN.
Prueba Dische de difenilamina para ADN
El ADN se puede identificar químicamente con la prueba de difenilamina de Dische. Las condiciones ácidas convierten la desoxirribosa en una molécula que se une con la difenilamina para formar un complejo azul. La intensidad del color azul es proporcional a la concentración de ADN. La Prueba de Dische detectará la desoxirribosa del ADN y no interactuará con la ribosa en el ARN. La cantidad de azul corresponde a la cantidad de ADN en solución.
El compuesto de difenilamina de la prueba de Dische interactúa con la desoxirribosa del ADN para producir una coloración azul.
- Obtener 3 tubos de ensayo y numerarlos 1-3.
- Suspender el ADN en bobina en 3 ml de agua destilada. MEZCLAR.
- Añadir a tubos:
- 2 ml de solución de ADN
- 1 ml de solución de ADN con 1 ml de H 2 O
- 2 ml de H 2 O
- Agrega 2 ml del reactivo de difenilamina de Dische's a cada tubo y mezcla bien.
- Colocar en un baño de agua hirviendo durante 10 minutos.
- Evalúa tus resultados. Un tubo transparente indica que no hay ácidos nucleicos. Un color azul indica la presencia de ADN. Un color verdoso indica la presencia de ARN.