2.4: Cromatografía
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Crédito: Theresa Knott [CC BY-SA 3.0 o GFDL]
La cromatografía es un término colectivo para un conjunto de técnicas analíticas utilizadas para separar mezclas. Croma significa color y gráfico significa escribir o dibujar. La cromatografía en papel es una técnica analítica utilizada para separar mezclas de productos químicos (a veces pigmentos coloreados) usando un método de partición. El papel en este método se denomina fase estacionaria porque no se mueve y sirve como sustrato o superficie para la separación. Los analitos (sustancias que se analizan) se separan entre sí en base a una afinidad diferencial a un disolvente. El disolvente se disuelve y transporta los analitos a lo largo de la matriz de la fase estacionaria. Dado que el solvente se mueve a través de una acción de mecha, se llama fase móvil.
La distancia que migra el analito a lo largo del papel relacionada con la distancia total que mueve el disolvente o la fase móvil se denomina Factor de Retención o RF.
¿Los colorantes alimentarios utilizados en los dulces coloreados son los mismos que los productos químicos aprobados por FD&C?
¿Cuántas manchas de colores espera ver para cada estándar de referencia?
- Obtener un trozo cuadrado de papel de cromatografía de 25 cm que encajará en el vaso de precipitados que servirá como cámara de cromatografía.
- Dibuja una línea de lápiz a través del extremo inferior del papel de cromatografía a unos 2 cm de la parte inferior.
- Dibuja marcas verticales adicionales a lo largo de esta línea cada 2 cm.
- Colocar los dulces coloreados en un matraz con 2 ml de etanol hasta que el color se disuelva en la solución.
- Usando un aplicador, crea una mancha muy pequeña en una marca de garrapata y deja secar.
- Repita la aplicación en el lugar para hacer una mancha muy pequeña y oscura.
- Continuar detectando estándares de referencia a lo largo de otras marcas de verificación. Estos estándares de referencia son colorantes alimentarios.
8. Colocar aproximadamente 1 cm de solución de fase móvil (una solución de agua salada muy polar) en el vaso de precipitados.
9. Enrolle el papel de filtro en un cilindro y fíjelo con grapas.
10. Colocar el cilindro en el vaso de precipitados y tapar durante 20 minutos o hasta que la fase móvil alcance los 2 cm de la parte superior del papel.
11. Marcar la distancia final de la fase móvil y secar el filtro.
12. Mida la distancia de cada punto desde el punto de partida.
- Cada mancha es un analito separado.
- Algunas manchas se separan en múltiples analitos.
- Mida CADA UNO.
13. Mida la distancia desde el punto de partida hasta el punto final que alcanzó el disolvente.
14. Calcular los valores de R f y tabular los resultados.
Tabla de Normas de Referencia
Tabla de incógnitas
Reflejar
1. Comparar y promediar los valores de R F de cada analito en toda la clase.
2. ¿Predijo el número de manchas que aparecerían de cada analito (referencia o caramelo)?
3. Asumiendo que todas las moléculas de tinte son de la misma masa, ¿qué influyó en los patrones de migración de cada mancha?
4. ¿Los colores utilizados en los dulces eran los mismos que las referencias?
5. ¿Qué significa si el color caramelo no coincidía con nada de los colores de comida del set de decoración de pasteles utilizado como referencias?