27.7: Reacciones en cadena de la polimerasa

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A mediados de los 80 se desarrolló un nuevo método para copiar (amplificar) el ADN en un tubo de ensayo. No requiere un plásmido ni un virus. Solo requiere un fragmento de ADN, algunos cebadores (pequeños polinucleótidos complementarios a secciones de ADN en cada hebra y a horcajadas sobre la sección de ADN a amplificar. Simplemente agregue a esta mezcla dATP, dCTP, dGTP, dTTP, y una ADN polimerasa termoestable del organismo Thermophilus aquaticus (que vive en aguas termales), y listo. La mezcla se calienta primero a una temperatura que hará que las hebras de ADNds se separen. La temperatura se enfría permitiendo que un gran exceso estoicimétrico de los cebadores se reproduzca con el ADNss. La polimerasa Taq termoestable (de Thermophilus aquaticus) polimeriza el ADN de los cebadores. La temperatura se eleva de nuevo, permitiendo la separación de cadenas de ADNds. Al enfriar los cebadores se reunen con el ADN original y recién sintetizado del último ciclo y se vuelve a producir la síntesis del ADN. Este ciclo se repite como se muestra en el diagrama. Esta reacción en cadena se llama reacción en cadena de la polimerasa (PCR). El ADN diana sintetizado se amplifica un millón de veces en 20 ciclos, o mil millones de veces en 30 ciclos, lo que se puede hacer en unas pocas horas.

Figura: Copia de ADN en el tubo de ensayo - la reacción en cadena de la polimerasa (PCR)

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Figura: Otra vista de PCR

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