3.1: Proteína en la orina

LECTURA RELACIONADA: Capítulo 26, 32. Ver Métodos en CD-ROM paraProteína total, orina.

Antecedentes para probar

Pequeñas cantidades de proteína se encuentran en la orina de individuos sanos. Estas proteínas incluyen albúmina y mucoproteína Tamm-Horsfall. Los individuos con daño tubular glomerular o renal excretan mayores cantidades de proteína en la orina final que los individuos sanos. Al igual que en el caso de la glucosa, las células del túbulo proximal en individuos sanos reabsorben la mayor parte de la albúmina presente en el filtrado glomerular. Si la capacidad de reabsorción de las células tubulares es superada por el aumento de la permeabilidad glomerular a la albúmina o por una pérdida de la capacidad reabsoptiva tubular proximal, aparecen mayores cantidades de albúmina en la orina final. La pérdida de la barrera glomerular puede resultar en una excreción proteica mucho mayor que la pérdida de capacidad de reabsorción tubular. Otras proteínas séricas, como la beta-2-microglobulina, también están presentes en la orina, sin embargo su concentración es mucho menor, por lo que la albúmina es con mucho la proteína más comúnmente monitoreada en el análisis de orina de rutina. La proteinuria, o más comúnmente albuminuria, se observa comúnmente en diabéticos, ya que esta enfermedad se encuentra en 5-6% de la población estadounidense. De igual manera, la hipertensión puede conducir a proteinuria. La varilla reactiva es un método rápido para determinar la presencia de proteína urinaria por encima de una concentración predeterminada.

Principio del Método

Cuando la albúmina se une a un colorante incrustado en la varilla reactiva, hay una liberación de H+ y un cambio local en el pH. Este cambio de pH da como resultado un cambio en el color de un tinte. La cantidad de cambio de color en el tinte es proporcional a la concentración de albúmina en la orina.

Las reacciones son las siguientes:

\[\text{albumin} + \text{dye} \rightarrow \text{albumin-dye complex} + H^{+}\]

\[H^{+}\; \text{dye} \rightarrow \text{color change}\]

El tinte requiere un cambio mínimo de pH antes de que sea visible un cambio de color. Para muchas barras graduadas esto está en el rango de 30-100 mg/L de orina. También hay un cambio de color máximo que se puede obtener con el reactivo de tira. Esto se establece comúnmente en 2000 mg/L.

Reactivos

Todos los reactivos para la reacción están incrustados en la almohadilla de la varilla reactiva. Al igual que con todos los reactivos almacenados en forma seca, su estabilidad se ve afectada por la humedad. Por lo tanto, los reactivos deben estar protegidos de la humedad. Además, se debe prestar una atención cuidadosa a la vida útil del fabricante, que debe aparecer en la etiqueta de cada contenedor de varilla medidora.

Ejemplar

La orina recién micada es el espécimen preferido. El primer espécimen de orina del día se considera el más deseable, porque es el más concentrado. Las muestras de orina son aceptables hasta cuatro horas después de la micción. Los especímenes refrigerados son aceptables hasta 24 horas después de la excreción.

Procedimiento

Recoger la orina en un recipiente de espécimen apropiado. Después de verificar que las tiras estén funcionando (ver control de calidad) sumerja rápidamente la tira en la orina, eliminando el exceso de líquido moviendo el borde de la tira contra el borde del recipiente a medida que retira la tira del recipiente. Después de este pase inicial para eliminar el exceso de líquido, retire cualquier líquido restante tocando todo el borde de la tira con una almohadilla de gasa o una toalla de papel No debe haber líquido visible en la tira excepto el de la almohadilla.

Resultados

Comience a cronometrar la reacción tan pronto como la tira se coloque en la orina. Después de 60 segundos lee la tira visualmente. Haga coincidir el color observado de la almohadilla con el color de la tabla en la botella de tiras o con una carta de colores, si eso está disponible. Registre su observación. Si hay un Clinitek u otro instrumento disponible, coloque la tira en el dispositivo tan pronto como sumerja la tira y registre el resultado impreso. Si lee visualmente, continúe leyendo los resultados después de 60 segundos, 120 segundos y 300 segundos.

Cálculos

No son necesarios cálculos para las lecturas visuales. Si se realizan lecturas del instrumento, el instrumento calibrado calcula la concentración de proteína. Si se utiliza un instrumento, correlacionar la lectura visual con la del instrumento.

Control de Calidad

Cuando se tomen lecturas visuales, tenga la certeza de que el lector no es daltónico. Antes de analizar una muestra de prueba, tomar dos tiras y probar una muestra testigo positiva y otra negativa. Estos resultados deben estar dentro de los valores aceptados. Idealmente, se debe probar un control positivo y negativo junto con cada lote de especímenes de pacientes analizados.

Valores esperados

La orina de individuos sanos debe dar resultados negativos. La orina de diabéticos conocidos puede dar resultados positivos, dependiendo de la extensión del daño glomerular causado por su diabetes.

REPORTE DE ESTUDIANTE

Solución	Puntuación visual de color			Valor del instrumento en tiempos establecidos
Tiempo	30 seg.	60 seg.	300 seg.
QC negativo
QC positivo
1 g/L
500 mg/L
250 mg/L
125 mg/L
62 mg/L
31 mg/L

Solución proteica de prueba 1
Solución proteica de prueba 2
Solución proteica de prueba 3

Preguntas de Discusión

1. ¿Cuál es el rango de linealidad del método visual?
2. ¿Cuál es el rango de linealidad del instrumento?
3. ¿El resultado de la prueba cambia con el tiempo?
4. Si el resultado cambia con el tiempo, ¿por qué?
5. ¿El rango de linealidad incluye todas las afecciones saludables y de enfermedad?

Notas de instrumentos

La impresión térmica en papel de muchos de estos instrumentos no es aceptable como copia permanente. La razón es que este tipo de papel es inestable, y se vuelve ilegible con el tiempo. Los resultados deben copiarse a mano en la tabla del paciente, o hacerse permanentes de alguna otra manera.