4.1: Cálculos

Un tecnólogo médico está realizando el siguiente ensayo para un fármaco cuyo peso molecular es de 318.5 daltons. Se extrae una alícuota de 2 mL de suero en 5 mL de éter dietílico. Se ha establecido que la eficiencia de extracción del analito en éter es de 85%. Cuatro mL de la capa de éter se transfieren a un tubo de ensayo y se evaporan a sequedad a 37 °C bajo una corriente de gas nitrógeno. El residuo se recoge en 2 mL de un reactivo que desplaza los máximos de absorbancia del analito a 310 nm. Después de 10 minutos de incubación a 37°C, la absorbancia de la solución se mide a 310 nm usando un espectrofotómetro con una trayectoria de 1 cm de longitud. La absorbancia registrada es 2.475. Dado que esta absorbancia excede la linealidad del instrumento, la absorbancia se mide en una dilución 1:10 de la muestra. La absorbancia de la muestra diluida se registra como 0.475. El coeficiente de extinción molar del analito a 310 nm es de 18.7 x 10 ³ L•mol ^-1 •cm ^-1.

PREGUNTA

Cuál es la concentración del fármaco en la muestra de suero original en mg/L.

Contestar

La concentración sérica de este fármaco es:________ mg/L.

Contestar

1. Primero calcule la concentración del analito en la solución final usando la ley de Beer de la siguiente manera (p. 88): A =\(\epsilon\) cb; donde\(\epsilon\) = 18.7 x 10 ³ L • mol ^-1 • cm ^-1, c = desconocido, b = 1 cm, y A = 0.475. $$\ begin {split} 0.475 &= 18.7\ times 10^ {3}\; L\ cdot mol^ {-1}\ cdot cm^ {-1}\; (1\; cm)\ veces c\\ c &= 0.0254\ veces 10^ {-3}\; mol/L\\ &\ quad o\\ c &= 0.0254\; mmol/L\ end {split} $$Desde esta absorbancia se obtuvo en una dilución 1:10, la concentración real en la muestra de 2 mL es: $$c = 0. 0254\; mmol/L\ veces 10 = 0.254\; mmol/l$$
2. Ahora calcule la cantidad de material extraído (p. 34-37). La concentración es de 0.254 mmol/L en la muestra de 2 mL, y la cantidad total de analito extraído es: $$\ text {concentración}\ times\ text {volumen de muestra} =\ text {amount} $$
3. Los micromoles de analito extraídos en la parte b fueron originalmente en una alícuota de 4 mL de éter que representa 4/5 del volumen total en el que se extrajo el analito. Así, la cantidad total real extraída de la alícuota de suero de 2 mL es: $$0.508\;\ mu mol/\; 4\; mL\ veces 5\; mL = 0.635\;\ mu mol\; extraído\; de\; 2\; mL\; mL\; de\; suero$$
4. Dado que la eficiencia de extracción es de solo 85%, el analito total extraído debe corregirse para el 15% del analito que no se extrajo. Esto se calcula de la siguiente manera: $$\ frac {\ text {cantidad extraída}} {\ text {eficiencia de extracción}} =\ texto {cantidad real presente en la muestra} =\ frac {0.635} {0.85} = 0.747\;\ mu moles$$Así, la concentración de analito en los 2 mL de suero es: $$\ frac {0.747\;\ mu\ moles\; extraído} {2\ mL;\; de\; muestra} = 0.37\;\ mu mol /mL $$
5. Para calcular (pp. 35-37) la concentración de analito en la muestra de suero en
   mg/L usa la siguiente fórmula de conversión: $$\ frac {\ mu mol} {mL}\ times\ frac {1000\; mL} {L}\ times mol.\; wt.\; (\ mu g/mol)\ times\ frac {1\; mg} {1000\;\ mu g} = mg/l$así $$\ frac {0.37\;\ mu mol} {mL}\ veces\ frac {1000\ ; mL} {L}\ times 318.5\;\ mu g/\ mu mol\ veces\ frac {1\; mg} {1000\;\ mu g} = 118\; mg/L$$La concentración sérica del fármaco es 118 mg/L (0.37 mol/L).