Mecanismo de transposición mediada por ADN
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- La transposasa codificada por un elemento transponible hace cuatro mellas inicialmente. Se realizan dos mellas en el sitio diana, una en cada hebra, para generar una ruptura escalonada con extensiones 5' (3' rebajadas). Las otras dos mellas flanquean el transposón; una mella se hace en una hebra de ADN en un extremo del transposón, y la otra mella se realiza en la otra hebra de ADN en el otro extremo. Dado que el transposón tiene repeticiones invertidas en cada extremo, estas dos mellas que flanquean el transposón son escisiones en la misma secuencia. Así, la transposasa tiene una actividad de mellado específica de secuencia. Por ejemplo, la transposasa de tNA se une a una secuencia de aproximadamente 25 pb localizada dentro de los 38 pb de repetición terminal invertida (Figura 9.10). Se mella una sola hebra en cada extremo del transposón, así como el sitio diana (Figura 9.13). Obsérvese que aunque la diana y el transposón se muestran separados en el dibujo bidimensional de la Figura 9.13, se yuxtaponen durante la transposición.
- En cada extremo del transposón, el extremo 3' de una cadena del transposón se une a la extensión 5' de una cadena en el sitio diana. Esta ligación también es catalizada por la transposasa. El ATP estimula la reacción pero puede ocurrir en ausencia de ATP si el sustrato está superenrollado. La ligación de los extremos del transposón al sitio diana genera un intermedio de transferencia de cadena, en el que los replicones donante y receptor están ahora unidos por el transposón.
