12.3B: Examen Directo Inmediato de Espécimen

Después de la recolección en contenedores apropiados, los especímenes clínicos se someten a un rápido examen en el laboratorio.

Objetivos de aprendizaje

• Describir cómo el examen directo inmediato de un espécimen es útil para determinar la morfología microscópica y macroscópica

Puntos Clave

• Los métodos de examen directo inmediato dependen de la naturaleza del espécimen.
• Las técnicas de diagnóstico de laboratorio incluyen pruebas directas con microscopio, y métodos inmunológicos o genéticos que proporcionan pistas inmediatas sobre la identidad del microbio o microbios en la muestra.
• Los métodos fenotípicos incluyen el examen de las características microscópicas, macroscópicas y bioquímicas de un patógeno.

Términos Clave

• biopsiado: para extraer y examinar una muestra de tejido de un cuerpo vivo con fines diagnósticos.

Examen directo inmediato del espécimen

Para la recolección de especímenes en sitios que normalmente contienen microflora residente, se debe tener cuidado de muestrear solo el sitio infectado y no las áreas circundantes. Por ejemplo, los hisopos de garganta y nasofaringe no deben tocar la lengua, la mejilla o la saliva. La saliva es un contaminante especialmente indeseable porque contiene millones de bacterias, de las cuales son flora normal. El esputo, la secreción mucosa que recubre las superficies respiratorias inferiores, especialmente los pulmones, se descarga al toser o se toma mediante un cateterismo para evitar la contaminación con saliva. También se puede muestrear el revestimiento mucoso de la vagina, cuello uterino o uretra con un bastón hisopado o aplicador.

Fuentes adicionales de especímenes son la vagina, el ojo, el canal auditivo, la cavidad nasal (todos por hisopo) y el tejido enfermo que ha sido extirpado quirúrgicamente (biopsiado). La orina se toma asépticamente de la vejiga con un catéter. Otro método llamado “captura limpia” se toma lavando la uretra externa y recogiendo la orina en la mitad de la corriente. Algunas técnicas de diagnóstico requieren orina de “captura sucia” de primera micción. Los materiales estériles como la sangre, el líquido cefalorraquídeo y el líquido tisular deben tomarse mediante aspiración estéril con aguja.

Las técnicas de diagnóstico de laboratorio incluyen pruebas directas con un microscopio, métodos inmunológicos o genéticos que proporcionan pistas inmediatas sobre la identidad del microbio o microbios en la muestra, y el cultivo, aislamiento e identificación de patógenos usando una amplia variedad de pruebas generales y específicas ( como sangre u otros fluidos).

La mayoría de las pruebas se clasifican en dos categorías: datos presuntivos, que colocan al microbio aislado en una categoría preliminar como género, y datos más específicos, confirmatorios, que proporcionan evidencia más definitiva de una especie. Algunas enfermedades se diagnostican sin necesidad de identificar microbios a partir de especímenes. Las pruebas serológicas en el suero de un paciente pueden detectar signos de una respuesta de anticuerpos. Un método que aclara si una prueba positiva indica infección actual o previa es tomar dos muestras con varios días de diferencia y ver si el título de anticuerpos está aumentando. Las pruebas cutáneas pueden identificar una reacción alérgica retardada a un microorganismo. Estas pruebas son importantes en el tamizaje de la población general para la exposición a un agente infeccioso como la rubéola o la tuberculosis.

Los principales métodos fenotípicos incluyen el examen directo de especímenes, la observación del crecimiento de los cultivos de espécimen en medios especiales y las pruebas bioquímicas de los cultivos de especímenes.

MORFOLOGÍA MICROSCÓPICA

Los rasgos que pueden ser útiles ayudan a la identificación de la forma y el tamaño de las células, la reacción de tinción Gram, la reacción ácido-resistente y las estructuras especiales, incluyendo endosporas, gránulos y cápsulas. Los microscopios electrónicos pueden identificar características adicionales como flagelos de la pared celular, pili y fimbrias.

Figura: Examen microscópico de E. coli: E. coli Gram negativa examinada bajo el microscopio de un paciente con infección del tracto urinario.

MORFOLOGÍA MACROSCÓPICA

Los rasgos que se pueden evaluar a simple vista también son útiles en el diagnóstico. Estos incluyen la aparición de colonias, incluyendo textura, forma, tamaño, pigmento, velocidad de crecimiento y patrones de crecimiento en caldo y gelatina.

CARACTERÍSTICAS FISIOLÓGICAS Y BIOQUÍMICAS

Las enzimas y otras propiedades bioquímicas de las bacterias son expresiones confiables y estables de la identidad química de cada especie. Existen pruebas diagnósticas para determinar la presencia de enzimas específicas y evaluar las actividades nutricionales y metabólicas.

Los ejemplos de prueba incluyen: fermentación de azúcares, capacidad para digerir o metabolizar polímeros complejos como proteínas y plosacáridos; producción de gas; presencia de enzimas como catalasa, oxidasa y descarboxilasa; y sensibilidad a fármacos antimicrobianos.

ANÁLISIS QUÍMICO

Esto implica analizar los tipos de sustancias estructurales específicas que contiene el microorganismo, como la composición química de péptidos en la pared celular y lípidos en la membrana.