26.6: Aplicaciones de Cromatografía

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Aunque el propósito principal de la cromatografía es la separación de una mezcla compleja en sus partes componentes, como se describe aquí, una separación cromatográfica también proporciona información cualitativa y cuantitativa sobre nuestras muestras. En los capítulos que siguen se encuentran ejemplos más detallados de aplicaciones cualitativas y cuantitativas.

Análisis Cualitativo

Como aprendimos en la Sección 26.2, los solutos migran a través de un sistema cromatográfico a una velocidad que es función de las propiedades de la fase móvil y la fase estacionaria. Esto significa que un soluto particular eluirá con un tiempo de retención consistente. Si esperamos que un soluto eluya con un tiempo de retención de 5.0 min, la presencia de un pico a 5.0 min sugiere, pero no evidencia definitiva de la presencia del soluto en nuestra muestra; sin embargo, la ausencia de un pico a 5.0 min es evidencia fuerte de que el soluto no está presente en nuestra muestra. Para una mezcla compleja, este tipo de técnica de cribado es una aplicación cualitativa útil de la cromatografía. Como veremos en los capítulos que siguen, el tipo de detector utilizado para monitorear una separación cromatográfica puede proporcionar información cualitativa útil.

Análisis Cuantitativo

Una separación cromatográfica produce una secuencia de picos que, idealmente, representan un solo soluto. Estos picos se caracterizan por un área que es proporcional a la cantidad de analito inyectado en la fase móvil. Al inyectar una serie de patrones, una curva de calibración del área del pico en función de la concentración del analito proporciona una manera de determinar la concentración del analito en una muestra. Cualquiera de las estrategias de calibración discutidas en el Capítulo 1.5 (estándares externos, adiciones de estándares y estándares internos) encuentran uso en un análisis cromatográfico cuantitativo. Determinar el área del pico de un soluto es relativamente sencillo cuando se usa un instrumento con interfaz de computadora con el software apropiado. Alternativamente, la altura de pico, que es más fácil de medir, puede usarse como sustituto, aunque se debe tener cuidado para asegurar que los picos sean simétricos y que los anchos de los picos sean consistentes para los estándares y las muestras.