7.10: Cromatografía en Columna de Pipet
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Cuña un poco de algodón en la parte inferior de una pipeta. Use un método de extracción para llenar sílice o alúmina hasta 2-2.5 pulgadas de alto. |
Agrega una\(0.5 \: \text{cm}\) capa de arena. | Añadir eluyente a la columna y aplicar presión con un bulbo de pipeta para forzar el eluyente a través de la columna para mojarla completamente. |
Recuerda romper el sello antes de soltar la bombilla de pipeta, o la succión arruinará la columna. Rellenar la columna con eluyente según sea necesario. |
Ajusta el nivel del eluyente a la capa de arena, y luego agrega delicadamente la muestra. Use presión para empujar el eluyente hacia abajo sobre la capa de sílice/alúmina. Enjuague con una porción de eluyente y empuje el disolvente sobre la columna. |
Llenar la pipeta con eluyente y aplicar presión para eluir la columna. Recoge líquido en tubos de ensayo. Siempre mantenga húmeda la sección de columna blanca (rellene cada vez que el nivel del eluyente se aproxime a la capa de arena). |
Cambie los tubos de ensayo periódicamente (tal vez cuando estén\(1 \: \text{cm}\) altos en tubos de ensayo pequeños) para recolectar diferentes fracciones. |
Mantenga las fracciones organizadas en una rejilla de tubos de ensayo en el orden en que se eluyeron. Use TLC para determinar la pureza de las fracciones y combinar las fracciones apropiadas. Retire el disolvente con el evaporador rotatorio. |