28.2: Eficiencia de Columna en Cromatografía Líquida

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En el Capítulo 26 se consideraron tres factores que afectan la ampliación de banda —múltiples trayectorias, difusión longitudinal y transferencia de masa— que expresan la relación entre la altura de una placa teórica\(H\), en función de la velocidad de la fase móvil\(u\), utilizando la ecuación de van Deemter

\[H = A + \frac{B}{u} + Cu \nonumber \]

donde\(A\) es la contribución de múltiples trayectorias,\(B\) es la contribución de la difusión longitudinal, y\(C\) es la contribución de la transferencia de masa. A diferencia de la cromatografía de gases, donde hay poca distancia entre el punto de inyección y la columna, y poca distancia entre la columna y el detector, un instrumento de HPLC a menudo debe incluir tubos adicionales para conectar entre sí el puerto de inyección de muestra y la columna, y la columna y el detector. Los solutos que se mueven a través de este tubo, que no incluye fase estacionaria, viajan con una velocidad que es más lenta en las paredes de la tubería y más rápida en el centro de la tubería; el resultado es un ensanchamiento adicional de la banda. La magnitud de esta contribución al ensanchamiento de banda se minimiza al mantener la longitud de la tubería de conexión lo más corta posible. mediante el uso de tubos con un diámetro interno más pequeño, y mediante el uso de caudales más bajos.