7.10: Cromatografía de Fase Inversa

Última actualización
Guardar como PDF

Page ID: 79172

\( \newcommand{\vecs}[1]{\overset { \scriptstyle \rightharpoonup} {\mathbf{#1}} } \) \( \newcommand{\vecd}[1]{\overset{-\!-\!\rightharpoonup}{\vphantom{a}\smash {#1}}} \)\(\newcommand{\id}{\mathrm{id}}\) \( \newcommand{\Span}{\mathrm{span}}\) \( \newcommand{\kernel}{\mathrm{null}\,}\) \( \newcommand{\range}{\mathrm{range}\,}\) \( \newcommand{\RealPart}{\mathrm{Re}}\) \( \newcommand{\ImaginaryPart}{\mathrm{Im}}\) \( \newcommand{\Argument}{\mathrm{Arg}}\) \( \newcommand{\norm}[1]{\| #1 \|}\) \( \newcommand{\inner}[2]{\langle #1, #2 \rangle}\) \( \newcommand{\Span}{\mathrm{span}}\) \(\newcommand{\id}{\mathrm{id}}\) \( \newcommand{\Span}{\mathrm{span}}\) \( \newcommand{\kernel}{\mathrm{null}\,}\) \( \newcommand{\range}{\mathrm{range}\,}\) \( \newcommand{\RealPart}{\mathrm{Re}}\) \( \newcommand{\ImaginaryPart}{\mathrm{Im}}\) \( \newcommand{\Argument}{\mathrm{Arg}}\) \( \newcommand{\norm}[1]{\| #1 \|}\) \( \newcommand{\inner}[2]{\langle #1, #2 \rangle}\) \( \newcommand{\Span}{\mathrm{span}}\)\(\newcommand{\AA}{\unicode[.8,0]{x212B}}\)

La sílice y la alúmina no son las únicas fases sólidas posibles. Se pueden comprar fases estacionarias que tengan cadenas largas de carbono unidas a perlas de sílice. Por ejemplo, una columna C18 contiene perlas que tienen cadenas de 18 carbonos unidas a ellas. Estas fases estacionarias son polvos, como la sílice, y se pueden cargar en una columna al igual que las latas de sílice.

Figura\(\PageIndex{1}\): Una caricatura de una cuenta C18

Una columna C18 es un ejemplo de una columna de “fase inversa”. Las columnas de fase inversa se utilizan a menudo con disolventes más polares como agua, metanol o acetonitrilo. La fase estacionaria es un hidrocarburo no polar, mientras que la fase móvil es un líquido polar.

El mismo enfoque también se puede utilizar en TLC. Si se pulveriza una placa con una capa de perlas C18, entonces podemos eluir la placa en un disolvente polar y separar los compuestos en una muestra. Por supuesto, las cosas se invierten ahora. Los compuestos más polares pasarán la mayor cantidad de tiempo en la fase móvil, y se moverán con mayor rapidez. Los compuestos menos polares pasarán la mayor parte del tiempo en la fase estacionaria, y se moverán más lentamente.

Figura\(\PageIndex{2}\): Caricatura de cromatografía de fase inversa.

Ejercicio\(\PageIndex{1}\)

En una columna de sílice (SiO2), se eluyeron tres compuestos en el siguiente orden usando una mezcla de hexanos/acetato de etilo: p-dimetilbenceno, p-dimetoxibenceno, luego p-metoxifenol. ¿Cuál podría esperar que el orden de elución sería en una columna C18?

Responder: p-metoxifenol, luego p-dimetoxibenceno, luego p-dimetilbenceno

Ejercicio\(\PageIndex{2}\)

Está tratando de eluir una muestra en una columna C18 usando mezcla 20:80 de agua:acetontril, pero los compuestos están tardando demasiado en llegar a través de la columna. ¿Qué debes hacer?

Responder: Los compuestos no están pasando mucho tiempo en la fase móvil, y tienen una afinidad mucho mayor por la fase estacionaria no polar; usan más acetonitrilo y menos agua en la fase móvil.t.

Una de las ventajas de la cromatografía de fase inversa es que existen muchos tipos de fase estacionaria entre las que elegir. Al cambiar el tipo de cadena que es a la cuenta, podemos alterar la fuerza con la que interactuará con ciertas moléculas. Tal vez un empaque de hidrocarburo completamente saturado interactúa bien con los hidrocarburos saturados en la muestra, haciéndolos eluir más lentamente. Por otro lado, tal vez un empaque más rígido que contenga aromáticos interactuará mejor con los hidrocarburos aromáticos en la muestra, haciendo que esos eluyan más lentamente. Incluso podríamos tener algunos grupos polares mezclados, para obtener una mezcla de interacciones.

Ejercicio\(\PageIndex{3}\)

Predecir el orden en que se eluirían los siguientes compuestos de una columna de fase inversa.

butilbenceno y bencilamina
2-decanol y ácido decanoico
1-heptanol y 1-hepteno
octanal y metil octil éter

Responder
Contestar a: bencilamina y luego butilbenceno
Respuesta b: 2-decanol luego ácido decanoico
Respuesta c: 1-heptanol y luego 1-hepteno
Respuesta d: octanal luego metil octy éter