7.15: Instrumentación mediante Cromatografía

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La cromatografía líquida a menudo se realiza con equipos más sofisticados. Un tipo de método se llama “cromatografía líquida de alto rendimiento” o HPLC. En lugar de empaquetar la fase estacionaria en una columna de vidrio, se puede comprar una columna de acero que contiene la fase estacionaria. La columna se puede conectar en un sistema que contiene una bomba de disolvente para empujar el eluyente a través de la columna. Después de pasar por la columna, el líquido puede entrar en un espectrómetro UV para que pueda detectar cuándo los compuestos están eluyendo de la columna. Todo el aparato está controlado por una computadora. Al hacer clic en un botón, puede cambiar la rapidez con la que fluye el solvente. También puede cambiar fácilmente la proporción de solventes en el eluyente haciendo clic en un botón.

Figura\(\PageIndex{1}\): Esquema de un sistema de HPLC.

Además de un espectrómetro UV, se pueden utilizar otros instrumentos con un sistema de HPLC para obtener información sobre los compuestos que se eluyen. Una de las más importantes es la espectrometría de masas (EM). La cromatografía líquida-espectrometría de masas (CL-EM) se puede utilizar para determinar los pesos moleculares de los compuestos a medida que eluyen. Esa información puede ser utilizada para ayudar a identificar el compuesto.

La cromatografía de gases es otra variación importante que debes conocer. En lugar de pasar un líquido sobre la fase estacionaria, un gas inerte se mueve sobre la fase estacionaria. El gas inerte puede ser helio o nitrógeno. El equilibrio aquí es entre los compuestos absorbidos en la fase estacionaria y los compuestos que se mueven en la fase gaseosa. Las atracciones intermoleculares con la fase estacionaria juegan un papel en GC, pero también lo hace el punto de ebullición de los compuestos.

Debido a que la mayoría de los compuestos no son muy volátiles, pasarían todo su tiempo sentados en la fase sólida en condiciones normales. Por esa razón, la columna en un cromatógrafo de gases se coloca dentro de un horno. La temperatura en este horno se controla cuidadosamente para que los compuestos pasen una mayor fracción de tiempo en la fase gaseosa. Un elemento calefactor en el horno puede aumentar la temperatura, y un ventilador está presente para ayudar a enfriarlo cuando.

Figura\(\PageIndex{2}\): Esquema de un sistema GC.

El eluyente no se puede variar en GC. Es sólo un gas inerte. Para controlar la separación de compuestos en GC, podemos cambiar la presión del gas inerte, que controla la rapidez con la que fluye el gas. También podemos controlar la temperatura, lo que influye en cuánto tiempo pasan los compuestos moviéndose en la fase gaseosa. También podemos elegir diferentes tipos de columnas con diferentes fases estacionarias.