2.9: Osmolalidad en suero

LECTURA RELACIONADA: Páginas 265-271. Ver Métodos en CD-ROM para Osmolalidad

OBJETIVO

Al finalizar este ejercicio, discusión apropiada y lectura relacionada, el alumno podrá:

1. Determinar la osmolatlidad sérica usando un osmómetro de presión de vapor.
2. Determinar la osmolalidad sérica usando un osmómetro de punto de congelación.
3. Estimar la osmolalidad por cálculo, dadas las concentraciones de varios componentes de una muestra.
4. Discutir las posibles explicaciones de discrepancias observadas en los resultados obtenidos utilizando los tres métodos diferentes de prueba.

PRINCIPIO

La osmolalidad es una expresión de la concentración de partículas disueltas (soluto) en una cantidad específica de solución (disolvente). Esta determinación puede hacerse directa o indirectamente. Los métodos directos suelen basarse en el punto de congelación o la presión de vapor de una solución. El método indirecto implica medir las concentraciones de solutos principales y luego calcular la osmolalidad. Cada método tiene ciertas ventajas y carencias. El rango de referencia para la osmolalidad sérica está en el rango de 280-300 mOsm/kg de agua.

MATERIALES

• Estándares
• Osmómetro de Presión de Vapor (Wescor)
• Osmómetro de punto de congelación (tipo avanzado o de precisión)
• Muestras de Suero
• Controles

Comentarios

Los estudiantes pueden realizar determinaciones séricas de CO ₂ antes o como parte de este ejercicio. Alternativamente, puede proporcionar valores de CO ₂ para cada una de las muestras utilizadas. Este ejercicio brinda la oportunidad de ilustrar cómo “otros factores” pueden corroborar una brecha aniónica anormal. Los estudiantes primero deberán determinar que la brecha aniónica es anormal y luego, utilizando un perfil de química sérica o “historia de casos” puede evaluar la validez de los resultados anormales.

PROCEDIMIENTO

1. Para cada control o muestra que se le asignó, determine la osmolalidad utilizando ambos tipos de instrumentos que están disponibles. Consulte las instrucciones de operación relacionadas con el instrumento específico que va a utilizar. Registre sus resultados en la hoja de datos. Haz una anotación de la apariencia de las muestras de suero que probaste.
2. Su instructor le dará las concentraciones de Na, K, BUN y glucosa de una o más de sus muestras. Utilizando las ecuaciones 14-2 (p.267) y las del método de Osmometría en el CD-ROM y calcular las osmolalidades séricas. Registre estos valores en la hoja de datos.

EJERCICIOS OPCIONALES:

1. 1. Su instructor le brindará las siguientes soluciones: 100 mmol/L NaC1 y 100 mmol/L de urea.
   2. Mida la osmolalidad de cada solución y registre en la hoja de datos.
2. Preparar un hemolizado de glóbulos rojos, como se describe en Ejercicio #15, Bilirrubina. Agregar un volumen muy pequeño de este hemolizado; por ejemplo 10 L, a 1 mL de una muestra cuya osmolalidad había sido previamente medida. Registro en hoja de datos.
3. Para aquellos laboratorios que tienen acceso tanto a la depresión del punto de congelación como a los osmómetros de presión de vapor, este experimento puede demostrar el efecto de un soluto volátil sobre la osmolaridad.
   1. Preparar una solución madre de etanol (75000\(\mu\) g/mL, 1630 mmol/L) agregando 10 mL de etanol al 95% a 100 mL de agua destilada.
   2. Colocar 1 mL de un suero cuya osmolalidad había sido previamente medida y calculada en cada uno de 2 tubos pequeños de ensayo de vidrio.
   3. A uno etiquetado como “control”, agregar 10\(\mu\) L de agua destilada. Al otro “pico” marcado, agregue lentamente 10\(\mu\) L de la solución madre de etanol mientras se mezcla suavemente la muestra en vórtex. Mezcle ambas soluciones.
   4. Mida la osmolalidad tanto por osmómetros de punto de congelación como de presión de vapor.
   5. Registro en hoja de datos.
   6. Calcular la brecha osmolal, como se describe en la Ecuación 14-3, p. 267 de Kaplan y Pesce.

FICHA TÉCNICA, EJERCICIO #9

NOMBRE: ___________ FECHA: ___________

RESULTADOS

	Apariencia	Presión de Vapor	Punto de congelación	Calculado
	Osmolaridad, mmol/L
Control Normal
Control Anormal
N.° de muestra
N.° de muestra

EJERCICIOS OPCIONALES

A.	Osmolalidad, mmol/L
0,1 M NaC1	________________
Urea 0.1 M	________________

B. La muestra hemolizada (círculo uno) se hemolizó levemente, moderadamente y groseramente.

Osmolalidad medida previamente (muestra #____) =	____________mmol/L
Osmolalidad de la muestra hemolizada =	____________mmol/L

C.	Presión de Vapor	Punto de congelación
	Osmolalidad, mmol/L
Muestra sin pinchos
Muestra enriquecida con etanol
Brecha de osmolalidad

CÁLCULOS

1. $$\ text {calculado mOsm/l} = 2\ cdot\ texto {Na (mmol/L)} +\ frac {glucosa\; mg/L} {180\; mg/mol} +\ frac {BUN\; mg/L} {28\; mg/mmol} $$
2. $$\ text {calculado mOsm/l} = 1.86\ cdot\ text {Na (mmol/L)} +\ frac {glucosa\; mg/L} {180\; mg/mol} +\ frac {BUN\; mg/L} {28\; mg/mmol} $$

Preguntas de Discusión

1. ¿Parece que la hemólisis interfiere con cualquiera de los métodos instrumentales?
2. Proporcionar una explicación plausible de cualquier discrepancia observada en los resultados, utilizando los diferentes métodos.
3. ¿Cuál parece ser la mayor ventaja/desventaja de cada método?
4. ¿Cómo afecta la presencia de un soluto volátil a los tres métodos de determinación de la osmolalidad? ¿Cuál es el efecto de un soluto volátil en la brecha de osmolalidad?
5. ¿Puede explicar alguna diferencia en las osmolalidades de las soluciones 0.1 M de NaC1 y 0.1 M de urea?