20: Análisis de Laboratorio de la Respuesta Inmune
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- 20.1: Aplicaciones prácticas de anticuerpos monoclonales y policlonales
- Además de ser cruciales para nuestra respuesta inmune normal, los anticuerpos proporcionan poderosas herramientas para fines de investigación y diagnóstico. La alta especificidad de los anticuerpos los convierte en una excelente herramienta para detectar y cuantificar una amplia gama de dianas, desde fármacos hasta proteínas séricas y microorganismos. Con ensayos in vitro, los anticuerpos se pueden usar para precipitar antígenos solubles, aglutinar células y neutralizar fármacos, toxinas y virus.
- 20.2: Detección de Complejos Antigeno-Anticuerpo in vitro
- Las pruebas de laboratorio para detectar anticuerpos y antígenos fuera del cuerpo (por ejemplo, en un tubo de ensayo) se denominan ensayos in vitro. Cuando ambos anticuerpos y sus antígenos correspondientes están presentes en una solución, a menudo podemos observar una reacción de precipitación en la que se forman grandes complejos (celosías) y se asientan de la solución. En las siguientes secciones, discutiremos varios ensayos in vitro comunes.
- 20.3: Ensayos de aglutinación
- Además de provocar la precipitación de moléculas solubles y la floculación de moléculas en suspensión, los anticuerpos también pueden agrupar células o partículas (por ejemplo, perlas de látex recubiertas de antígeno) en un proceso llamado aglutinación. La aglutinación se puede utilizar como indicador de la presencia de anticuerpos contra bacterias o glóbulos rojos. Los ensayos de aglutinación suelen ser rápidos y fáciles de realizar en un portaobjetos de vidrio o placa de microtitulación.
- 20.4: Inmunoensayos enzimáticos (EIA) y ensayos inmunoabsorbentes ligados a enzimas (ELISA)
- Se utilizan inmunoensayos enzimáticos (EIA) para visualizar y cuantificar antígenos. Utilizan un anticuerpo conjugado con una enzima para unirse al antígeno, y la enzima convierte un sustrato en un producto final observable. El sustrato puede ser un cromógeno o un fluorógeno. La inmunotinción es una técnica de EIA para visualizar células en un tejido (inmunohistoquímica) o examinar estructuras intracelulares (inmunocitoquímica). Se utiliza ELISA directo para cuantificar un antígeno en solución.
- 20.5: Técnicas de Auto-Anticuerpo Fluorescente
- La visualización rápida de bacterias de una muestra clínica como un hisopo de garganta o esputo se puede lograr a través de técnicas de anticuerpos fluorescentes (FA) que unen un marcador fluorescente (fluorógeno) a la región constante de un anticuerpo, dando como resultado una molécula indicadora que es rápida de usar, fácil de ver o medir, y capaz de unirse a marcadores diana con alta especificidad. También podemos etiquetar células, lo que nos permite cuantificar con precisión subconjuntos particulares de células o incluso purificarlas para futuras investigaciones.
Notas al pie
- 1 Chin, Curtis D. et al., “Dispositivo móvil para el diagnóstico de enfermedades y el seguimiento de datos en entornos de recursos limitados”, Química clínica 59, núm. 4 (2013): 629-40.
- 2 Emarts, H., “Dispositivo rápido y de bajo costo utiliza la nube para acelerar las pruebas de VIH y más”, 24 de enero de 2013. Consultado el 14 de julio de 2016. http://engineering.columbia.edu/fast...g-hiv-and-more.
Miniatura: Se utilizaron anticuerpos ligados a enzimas contra CD8 para teñir las células CD8 en esta preparación de médula ósea usando un cromógeno. (crédito: modificación de obra de Yamashita M, Fujii Y, Ozaki K, Urano Y, Iwasa M, Nakamura S, Fujii S, Abe M, Sato Y, Yoshino T).